初探影響食品微生物檢驗的幾點因素
【摘要】 本文從人員、設(shè)施、環(huán)境等方面闡述了影響食品微生物檢驗的幾點因素,以確保食品微生物檢驗數(shù)據(jù)的準確可靠。【關(guān)鍵詞】 無菌 微生物 檢驗
【Abstract】 The article make the exploration about a few factors including human, facilities, environment that should influence the examination about the food microorganism,to ensure the accuracy of the data of the examination of the food microbiological.
【Key words】 Asepsis Microorganism Examination
食品微生物檢驗的目的就是要為生產(chǎn)出安全、衛(wèi)生、符合產(chǎn)品標準的食品提供科學依據(jù)。因而對食品微生物進行檢驗至關(guān)重要。本人就如何保證食品微生物數(shù)據(jù)的準確性應(yīng)注意的幾點因素談?wù)勛约旱恼J識。
1 人的因素
為了保證微生物檢驗的高質(zhì)量,要求檢驗人員的知識結(jié)構(gòu)、專業(yè)技術(shù)能力和檢驗的高水平。微生物檢驗工作人員不僅要有專業(yè)知識和熟練的技術(shù),而且還必須具備對工作的高度責任感和實事求是的科學工作作風。確保實驗室人員得到及時培訓及不斷更新知識,學習和掌握新理論、新技術(shù)和新方法。保存技術(shù)人員有關(guān)資歷、培訓、技能和精力等技術(shù)業(yè)績檔案。
2 設(shè)施、環(huán)境
實驗室應(yīng)具有進行微生物檢驗適宜充分的設(shè)施條件,包括檢測設(shè)施(專用于微生物檢測和相關(guān)活動)及輔助設(shè)施(大門、走廊、管理區(qū)、樣品區(qū)、清潔間)特殊的設(shè)備要在特殊的環(huán)境下放置和操作。
2.1無菌實驗室的建設(shè)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定,符合無回路的原則。設(shè)有人流和物流通道。
2.2 在時問和空間上有效隔離各種檢測活動。
2.3 為保證檢測樣品的完整性,操作時應(yīng)按照規(guī)定的程序并采取預(yù)處理措施。
2.4 無菌區(qū)(檢驗區(qū))。
(1)紫外線消毒:在室溫下,220V,30W紫外燈下方垂直位置 lm處的253.7nm紫外線輻射強度應(yīng)≥70μW/cm2,低于此值時應(yīng)更換,適當數(shù)量紫外燈,確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。紫外線消毒時無菌室內(nèi)應(yīng)保證清潔干燥在無人條件下可采取紫外線消毒,作用時間為30min。人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。
(2)臭氧消毒:封閉無菌室內(nèi),無人條件下,采用20mg/m3濃度的臭氧作用時間應(yīng)≥30min,消毒后室內(nèi)臭氧濃度≤0.2mg,/m2時方可人內(nèi)作業(yè)。
(3)無菌室空氣滅菌效果驗證方法(沉降法):一般情況下無菌室面積≤30m2時從所設(shè)定的一條對角線上選取3點,即中心l點、兩端各距墻1米處各取一點;無菌室面積≥30m2時選取東、南、西、北、中點均距墻lm各取一點。
在所選位點,將平板(90mm2的)距地面80厘米處開蓋暴露l5min,置于36±1℃,恒溫培養(yǎng)48h±lh,確認平板上的菌落數(shù),如大于所設(shè)定的風險值應(yīng)分析原因并采取適當措施。
2.5 通過以下途徑減少污染:
(1)表面光滑的墻、天花板、地面和桌椅。(2)地面、墻壁、天花板連接處應(yīng)有弧,地面應(yīng)防滑。(3)當進行檢測時應(yīng)關(guān)閉門窗。(4)換氣系統(tǒng)應(yīng)有空氣過濾裝置。(5)獨立的洗手池。(6)固定設(shè)備和室內(nèi)裝置的木質(zhì)表面應(yīng)密閉包裹。(7)不使用粗糙而裸露的木塊。(8)檢驗室內(nèi)不得堆放雜物。
3 設(shè)備及藥品配置
3.1培養(yǎng)箱、水浴箱、干熱滅菌箱和高壓滅菌鍋:
①首次安裝時要對溫度的穩(wěn)定性和一致性進行校準。②記錄培養(yǎng)箱、水浴鍋和干熱滅菌箱的溫度穩(wěn)定性達到平衡所需的時間。③每次經(jīng)檢定合格后方能使用,并對這些設(shè)備的運行溫度進行記錄。④定期清潔和消毒內(nèi)外壁。⑤高壓滅菌鍋的時間和溫度指示的準確度應(yīng)滿足要求,不能僅依靠高壓鍋的壓力表測定時間,應(yīng)使用感應(yīng)器控制和監(jiān)控運轉(zhuǎn)循環(huán)情況。 3.2藥品配置:
①培養(yǎng)基通常采用高壓濕熱滅菌法,121℃滅菌15min,特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進行滅菌(如含糖培養(yǎng)基ll5℃滅菌20min。②部分培養(yǎng)基(如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基、膽硫乳培養(yǎng)基等),只能煮沸滅菌。③對熱敏感的培養(yǎng)基或添加物應(yīng)采用膜過濾方法進行過濾除菌。
3.3器具
①濕熱滅菌:采用高壓滅菌器121℃滅菌20min,適用于玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等。按照GB15981的規(guī)定評價高壓滅菌器的殺菌效果。在高壓滅菌時注意滅菌物品不要相互擠壓過緊,以保證蒸汽通暢,使所有物品的溫度均上升,才能達到徹底滅菌的目的。②干熱滅菌:采用干燥箱滅菌160℃滅菌2h,180℃滅菌1h適用于玻璃器皿、不銹鋼器具等。
4 樣品的采集、運輸和保存
樣品的采集必須具有代表性,要考慮到各種影響樣品質(zhì)量的因素,防止樣品受到外源性污染,防止樣品變質(zhì)和細菌生長。采樣必須在無菌操作下進行,所謂無菌操作是指杜絕任何病原性或非病原性微生物進入樣品。采樣用具及包裝物必須是滅菌的。冷凍食品保持冷凍狀態(tài);非冷凍食品需保持在(0~5)℃中保存。樣品的運輸和保存應(yīng)避免日光照射,必須防止外來物的污染。樣品從采樣點送達實驗室應(yīng)越快越好,一般不超過3h,實驗室檢測工作應(yīng)盡快進行,長時間冷凍可導致微生物死亡,反復冷凍和融化對微生物也有很大影響必須盡快進行檢測。
5 操作
(1)操作人員必須牢固樹立無菌觀念,整個操作均要求無菌操作,盡量靠近火焰,動作要迅速,從微生物的分離、純化到接種,手法規(guī)范。嚴格按照GB/T4789食品微生物檢驗標準中的操作規(guī)程進行檢驗。
(2)進入無菌室從樣品的制備到檢驗都要為防止二次污染采取必要措施,如樣品及器皿擺放整齊便于操作,操作過程熟練。
(3)樣品取樣時用無菌工具無菌操作取樣。
(4)原始記錄要真實準確,不得隨意填寫。按照GB/T4789標準規(guī)定的方法進行數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定。
綜上所述,只要我們遵守職業(yè)道德,嚴謹科學態(tài)度,注意以上幾個環(huán)節(jié)就能使我們微生物檢驗數(shù)據(jù)的準確性得以保證,以把好食品衛(wèi)生和安全提供可靠依據(jù)。
參 考 文 獻
[1] 李勇.實驗室生物安全[M].第1版.北京:軍事醫(yī)學科學出版社,2009,09.
[2] 齊小秋.病原微生物檢驗.衛(wèi)生部病原微生物檢驗教材編寫組,2009,02.
[3] 李志勇,謝均憲,許龍巖.食品微生物檢驗的質(zhì)量控制[J].檢驗檢疫科學,2004,14(4).
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