大黃素對(duì)大鼠牙周組織抗氧化作用
【摘要】 目的 探討大黃素對(duì)實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠牙周組織的抗氧化作用。方法 將牙周炎大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、碘甘油治療組和大黃素治療組，均用大黃素局部涂抹(3次/d),共30d。治療結(jié)束后測(cè)定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH?Px)活力。結(jié)果 大黃素能顯著提高SOD活力，降低血清中MDA含量，并增加GSH?Px活力。結(jié)論 大黃素作為一種有效的抗氧化成分，對(duì)恢復(fù)牙周組織健康有明顯效果。
【關(guān)鍵詞】 大黃素
研究表明〔1〕，氧源性自由基(Oxygen derived freeradival,ODFR)參與牙周病的病理過(guò)程，是牙周損傷的重要分子機(jī)制。大黃有效成分蒽醌衍生物主要有大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素和大黃素甲醚等。其中，大黃素抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)，對(duì)肺炎雙球菌、鏈球菌、白喉?xiàng)U菌、枯草桿菌、炭疽桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌及多種常見(jiàn)的致病性真菌均有較強(qiáng)的抗菌作用，并具有抗炎活性〔2〕。本分文析了大黃素對(duì)大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽氧化酶(GSH?Px)活力以及丙二醛(MDA)含量的影響，以期進(jìn)一步闡明大黃素和治療牙周炎的作用機(jī)制。
1 與方法
1?1 樣品來(lái)源及純度 大黃素(中國(guó)品生物制品檢定所)，純度為98%，按參考文獻(xiàn)〔3〕配制成0?1mg/ml大黃素溶液。
1?2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型制備〔4〕 80只SD大鼠(黑龍江省藥品所動(dòng)物室)，體重200～230g，雌雄各半。隨機(jī)取出14只作為正常對(duì)照組，其余大鼠以2%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔內(nèi)注射麻醉。直徑0?2mm結(jié)扎鋼絲結(jié)扎雙側(cè)第一磨牙一圈，每周復(fù)查2次。結(jié)扎7d后，于股四頭肌內(nèi)注射以0?45ml生理鹽水稀釋的1?25mg潑尼松龍，隔日1次，共8次。選取造模成功的42只SD大鼠隨機(jī)分3組，模型組、碘甘油治療組和大黃素治療組，每組14只。在鼠上頜第1，第2磨牙之間頰腭側(cè)病變處分別注射0?1mg/ml大黃素溶液各0?2ml,30d后均采用摘除眼球法取血，自然凝固3～5h,3000r/min離心20min,吸取血清冷凍保存，待測(cè)SOD、MDA和GSH-Px含量。
1?3 檢測(cè)方法 (1)血清SOD活力測(cè)定：采用亞硝酸鹽法；(2)血清過(guò)氧化脂質(zhì)的測(cè)定：采用硫代巴比妥酸(TBA)法；(3)血清GSH-Px活力測(cè)定：采用硫代二硝基苯甲酸(DTNB)直接法。
1?4 分析 采用SPSS 12?0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料的組間差異用T檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2?1 大黃素對(duì)血清中SOD活性的影響 各組SOD測(cè)定結(jié)果為，模型組(420±45?7)，碘甘油治療組(488±52?6)，大黃素治療組(476±48?6)，正常對(duì)照組(501±33?8)U/L。正常組、碘甘油治療組和大黃素治療組血清SOD活力與模型組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0?05)，表明大黃素能顯著提高牙周炎大鼠血清SOD活力。血清SOD活力與碘甘油治療組和正常組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0?05)。
2?2 大黃素對(duì)血清MDA含量的影響 各組MDA測(cè)定結(jié)果為，模型組(7?1±1?1)，碘甘油治療組(4?83±0?65)，大黃治療組(5?12±0?67)，正常對(duì)照組(4?56±0?56)μmmol/L。正常組、碘甘油治療組和大黃素治療組血清MDA含量均與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0?05)，大黃素能顯著降低牙周炎大鼠血清MDA含量，且血清MDA含量與碘甘油治療組和正常組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0?05)。
2?3 大黃素對(duì)血清中GSH-Px活力的影響 各組GSH?Px測(cè)定結(jié)果為，模型組(48?7±5?4)，碘甘油治療組(78?5±8?55)，大黃治療組(73?2±8?3)，正常對(duì)照組(80?3±9.7)U/L。正常組、碘甘油治療組和大黃素治療組血清GXH-Px活力與模型組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0?05)，表明大黃素能顯著提高牙周炎大鼠血清GXH-Px活力，血清GXH-Px活力與碘甘油治療組和正常組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0?05)。
3 討論
在牙周炎活動(dòng)期，局部毛細(xì)血管通透性升高，導(dǎo)致牙齦出血、腫痛，同時(shí)有大量吞噬細(xì)胞進(jìn)入局部組織，在吞噬細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)中存在產(chǎn)生氧自由基的酶系統(tǒng)，該酶可被細(xì)菌及骨毒素、抗原抗體復(fù)合物等激活，產(chǎn)生吞噬作用，使耗氧量激增。其增加的`耗氧量基本上都用于生成超氧陰離子。通過(guò)自由基鏈反應(yīng)又生成其他自由基，引起脂質(zhì)過(guò)氧化，形成過(guò)多脂質(zhì)過(guò)氧化物，損傷生物膜。脂質(zhì)過(guò)氧化物分解產(chǎn)物MDA的量可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接反映出細(xì)胞損傷的程度。SOD能清除超氧陰離子，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。在牙周炎活動(dòng)期，局部組織產(chǎn)生大量自由基，由于強(qiáng)氧化作用損傷SOD活力或由于超氧陰離子生成增多，使SOD消耗增加，因而SOD活力下降。GSH-Px的主要功能是清除各種生物大分子的過(guò)氧化物，因此，在牙周炎癥期GSH-Pxr活力明顯下降〔5〕。大黃素作為一種傳統(tǒng)，具有抗炎作用，同時(shí)還具有清除氧自由基的抗氧化作用。大黃素對(duì)大鼠的腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化引起的極微弱化學(xué)發(fā)光均有猝滅作用，構(gòu)效關(guān)系提示大黃素臨位與中位羥基取代是該類物質(zhì)抗氧化所必需的〔6〕。本實(shí)驗(yàn)除了證實(shí)牙周炎癥時(shí)，SOD、GSH-Px活力會(huì)下降，而MDA含量會(huì)升高。同時(shí)也證明大黃素除了具有抗菌作用外，還可能通過(guò)增加血清SOD和GSH-Px活力，減少M(fèi)DA含量，對(duì)牙周組織起到雙重保護(hù)作用。
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