抗酸桿菌痰涂片檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室生物安全

        抗酸桿菌痰涂片檢驗(yàn)作為對(duì)傳染性肺結(jié)核的診斷手段比X線診斷準(zhǔn)確性高；作為實(shí)驗(yàn)方法，技術(shù)相對(duì)簡(jiǎn)單，容易標(biāo)準(zhǔn)化和完成操作；其投入設(shè)備少、成本低；從收到標(biāo)本到報(bào)告結(jié)果的時(shí)間短，能夠及時(shí)、準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)涂陽(yáng)患者的治療效果，被我國(guó)設(shè)為結(jié)核病控制項(xiàng)目的主要實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法。但結(jié)核分枝桿菌（抗酸桿菌）為二類高致病性病原菌，其自身的生物學(xué)特性使其容易在實(shí)驗(yàn)室造成對(duì)工作人員及相關(guān)人員的感染和環(huán)境的污染，形成對(duì)公眾的傷害，操作結(jié)核分枝桿菌的實(shí)驗(yàn)室人員結(jié)核病發(fā)病率比其他人群高三倍，因此抗酸桿菌痰涂片檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室安全問(wèn)題已經(jīng)成為當(dāng)前結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室必須關(guān)注的問(wèn)題
        目前，在市、縣、鄉(xiāng)級(jí)結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)沒(méi)有建立BSL-2實(shí)驗(yàn)室的情況下，就更好地保障實(shí)驗(yàn)室的生物安全問(wèn)題，本人根據(jù)多年的工作經(jīng)驗(yàn)，談一些粗淺的看法。
        實(shí)驗(yàn)室的生物安全工作的開(kāi)展應(yīng)遵循科學(xué)合理、安全首位、軟件在先、嚴(yán)格管理、遠(yuǎn)離病原、預(yù)防為主、使用方便、厲行節(jié)約的原則，具體實(shí)施如下：
實(shí)驗(yàn)室首先要配備必須的安全設(shè)施：
        1）有獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室，室內(nèi)有上下水，通風(fēng)良好；
        2）室內(nèi)設(shè)通風(fēng)柜、高壓滅菌器、紫外線燈、廢物桶、感應(yīng)水龍頭；
        3）標(biāo)本的收集、涂片、染色、鏡檢、登記和涂片的儲(chǔ)存應(yīng)在各自獨(dú)立的區(qū)域；
        4）設(shè)有獨(dú)立生物咳痰室，內(nèi)設(shè)紫外線燈（按1.5W每立方米計(jì)算），每個(gè)病人咳痰后必須打開(kāi)紫外線燈滅菌，如果沒(méi)有此設(shè)施，要叮囑病人在遠(yuǎn)離人群的開(kāi)放空間留取標(biāo)本，防止肺結(jié)核病人咳漱產(chǎn)生的結(jié)核桿菌氣溶膠造成對(duì)人的傳播及對(duì)環(huán)境的污染。
        其次要做好個(gè)人防護(hù)，實(shí)驗(yàn)室工作人員要配備一次性聚氯乙烯手套、一次性帽子、口罩、鞋套和防護(hù)服。
        第三要使用以下消毒劑：5%的苯酚溶液、75%的酒精、甲醛、2%的戊二醛及2%的乙醛溶液。
        在操作環(huán)節(jié)上，嚴(yán)格遵守以下方法和措施：
        實(shí)驗(yàn)前首先要用紫外線燈將操作臺(tái)面及室內(nèi)照射一小時(shí)，工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前必須穿好防護(hù)服、戴上口罩、手套、鞋套，病檢查有無(wú)破損；女檢驗(yàn)員長(zhǎng)發(fā)束在帽內(nèi)；操作人員在操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程和標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP)；在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，禁止一切與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的活動(dòng)，保證集中精力完成操作；在操作過(guò)程中，要警惕分枝桿菌氣溶膠的產(chǎn)生，涂片操作要小心謹(jǐn)慎，動(dòng)作輕緩，固定和染色操作時(shí)產(chǎn)生氣溶膠的幾率較大，Allen  Bw實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，樣品熱固定不能殺滅所有涂片標(biāo)本中的結(jié)核桿菌，若涂片長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫中，殘留活菌減少，并僅見(jiàn)于涂片厚的部分，從而提高熱固定時(shí)痰液對(duì)細(xì)菌的保護(hù)作用，新鮮痰液粘滯度越大，加熱固定時(shí)對(duì)細(xì)菌的保護(hù)作用越強(qiáng)，為避免此風(fēng)險(xiǎn)，操作人員要做到雙手伸入操作臺(tái)操作，面部通過(guò)通風(fēng)柜的玻璃與操作臺(tái)面隔開(kāi)（在操作過(guò)程只利用通風(fēng)柜的屏障功能）；完成涂片后立即染色，若不能及時(shí)染色涂片，應(yīng)浸泡在2%乙醛溶液中，不可以將涂片暴露在空氣中，涂片在空氣中暴露的時(shí)間越長(zhǎng)，感染的機(jī)會(huì)越大，這是操作者尤其需要注意的問(wèn)題；另外涂片不能涂抹太厚尤其是新鮮痰液；經(jīng)過(guò)染色的結(jié)核分枝桿菌已不能存活。       實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有物品歸放原位，標(biāo)本盒及其他廢棄物放入5%的苯酚溶液廢物桶中，涂片用鑷子夾取放入儲(chǔ)存柜內(nèi)，用5%的苯酚溶液擦拭玻片夾、放置標(biāo)本的搪瓷盒、臺(tái)面，鑷子放在75%的酒精中浸泡，關(guān)上通風(fēng)柜的玻璃窗，打開(kāi)通風(fēng)柜紫外線燈；操作人員在實(shí)驗(yàn)室近門處依次脫掉帽子、防護(hù)服、鞋套、手套裝入高壓滅菌袋，用肥皂洗手，流水沖洗；出門后打開(kāi)室內(nèi)紫外線燈，關(guān)好門；兩小時(shí)后關(guān)閉紫外線燈、例行安全檢查后關(guān)閉門窗離開(kāi)；一次性手套、帽子、鞋套、過(guò)期的涂片和經(jīng)過(guò)24小時(shí)浸泡的廢棄物經(jīng)高壓滅菌后按醫(yī)療垃圾處理；高壓滅菌時(shí)采用生物或化學(xué)指示劑以確保滅菌效果；防護(hù)服在每次實(shí)驗(yàn)完畢后均需高壓滅菌。
        為確保實(shí)驗(yàn)室生物安全，還要建立建全規(guī)章制度并嚴(yán)格遵守。規(guī)章制度主要強(qiáng)調(diào)以下幾個(gè)方面：
        1）操作人員上崗前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的生物安全培訓(xùn)。
        2）實(shí)驗(yàn)室管理方面，應(yīng)嚴(yán)格限制非實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外感染的機(jī)會(huì)，實(shí)驗(yàn)室必須保持肅靜，操作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室盡量避免攜帶非必須物品，實(shí)驗(yàn)臺(tái)上不放置任何與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品，禁止吸煙、飲食及用嘴濕潤(rùn)筆或標(biāo)簽等，不要用手撫摸頭面部。
        3）制定實(shí)驗(yàn)室和咳痰室定期消毒制度。
        4)制定操作員定期肺部檢查制度。
        除建立健全規(guī)章制度外，還要制定實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急預(yù)案，包括防水、防火、意外暴露的處理及污染消毒等。
        總之，實(shí)驗(yàn)室生物安全不僅涉及操作人員自身安全，還涉及他人健康，所以這個(gè)問(wèn)題必須引起我們高度重視，以便更好地保障結(jié)核病控制項(xiàng)目的實(shí)施成果。

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